Вирусная диарея КРС: сиптомы и лечение

VI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум – 2014

ЛЕЧЕНИЕ ВИРУСНОЙ ДИАРЕИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

• Авторы
• Файлы работы
• Сертификаты

В настоящее время чаще всего наблюдается бессимптомное носительство вируса, которое редко сопровождается «классическими» клиническими проявлениями. Вирус выступает как сопутствующий течению других вирусных инфекций, или как «пусковой механизм».

Острые вспышки заболевания регистрируются очень редко и проявляются чаще в виде респираторного синдрома. В этих случаях вирус проявляет своё иммуносупрессивное свойство, что приводит к провоцированию и усилению клинического течения других (в том числе и вирусных) болезней.

Заболевание широко распространено на территории Урала и Сибири, однако уровень инфицированности скота в областях различен. Возможно, это связано с наличием или отсутствием вирусологических исследований в них. Наибольшее распространение заболевание имеет в крупных хозяйствах с интенсивным типом ведения животноводства, где сохранено поголовье, активно проводится искусственное осеменение и т.д. Особенно это касается племенных хозяйств.

Вирусная диарея (Diarrhea viralis bovum) – контагиозное заболевание крупного рогатого скота, проявляющееся сильной депрессией, гиперимией, изъявлением слизистых оболочек пищеварительного тракта и дыхательных путей, повышением температуры тела, диареей, ринитом и конъюктивитом. Восприимчив скот различных возрастных групп, однако тяжелее всего болеет молодняк в возрасте от 3 до 12 месяцев.

Со слов бригадира ГСХУ «Минлинское», 29.06.13 г. телёнок перестал вставать, 03.07.13 г. утром отказался от корма, был вял. 03.07.13 г. в 13.30 ч. была оказана лечебная помощь. 04.07.13 г. в 12.30 ч. телёнок пал. 04.07.13 г. произведено патологоанатомическое вскрытие трупа животного и поставлен предварительный диагноз – вирусная диарея крупного рогатого скота.

04.07.13 г. Ветеринарными врачами был произведён клинический осмотр всего поголовья крупного рогатого скота ГСХУ «УОХ Миндерлинское». В результате чего было обнаружено 98 животных с одинаковыми симптомами (слабость, угнетение, диарея, слезотечение, слизистые истечения из носа, учащение дыхания, повышение температуры, отсутствие аппетита).

05.07.13 г. произвели взятие крови у 98 животных, в дальнейшем получены парные сыворотки крови и отправлены для исследования в краевую ветеринарную лабораторию г.Красноярска.

05.07.13 г. для всех животных применили поливалентную гипериммунную сыворотку против вирусной диареи, сальмонеллеза, колибактериоза, пастереллёза, парагриппа – 3, инфекционного ринотрахеита, короновирусной инфекции крупного рогатого скота.

Основные патологические изменения в пищеварительном тракте.

Содержимое всех отделов кишечника слизисто-водянистое, с примесью слизи и крови, зловонное. Тонкий кишечник местами катарально, геморрагически воспалён, с наличием язв серо-жёлтого цвета, слизь жёлто-зелёного цвета. Толстый отдел кишечника очагово гиперемирован и воспалён.

Брызжеечные лимфатические узлы увеличены, сочны. Печень тёмно-вишнёвого цвета, увеличена, с очагами некроза величиной с горошину белого цвета. Желчный пузырь воспалён, увеличен, слизистая с точечными кровоизлияниями. Желчь густая тёмно-зелёного цвета. Почки увеличены в объёме, отёчны, дряблой консистенции. Мочевой пузырь наполнен жидкостью соломенного цвета, слизистая – с кровоизлияниями.

С 29.06.13 г. по 03.08.13 г. заболело 98 голов крупного рогатого скота, из них 27 голов взрослого скота и 71 молодняка. Из заболевших пало 15 голов взрослого крупного рогатого скота, 27 голов молодняка. Диагноз установили специалисты КГУ «Краевой ветеринарной лаборатории».

С лечебной целью применили поливалентную гипериммунную сыворотку против сальмонеллёза, колибактериоза, пастереллёза, диплококкоза, вирусной диареи, парагриппа – 3, инфекционного ринотрахеита, короновирусной инфекции крупного рогатого скота. Препарат вводили внутримышечно молодняку по 30-40 мл., взрослому крупному рогатому скоту по 50-60 мл. Иммунитет у привитых сывороткой животных длился 10-14 суток. Для подавления секундарной микрофлоры использовали антибиотики и сульфаниламидные препараты.

Биомицин внутрь 2-3 раза в день по 0,02 г/кг в течение 5 дней. Внутримышечно стрептомицин 3-5 тыс. ЕД на 1 кг. массы животного 5-7 дней. Перорально левомицитин 10-20 тыс. ЕД применяют препарат 2 раза в день 5-7 дней. Также использовали ихтиол в дозе 5-10 г в 100-200 мл. воды в течение 3-4 дней.

В рацион ввели витамины, увеличили дачу щелочных кормов (костную золу и муку), корнеклубнеплоды, корма содержащие сахар, глюкозу.

С профилактической целью клинически здоровым животным применили поливалентную сухую ассациированную вакцину против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота «Тривак». Телятам в возрасте до 3-х месяцев и старше вакцину вводили двукратно внутрикожно по 0,2 мл. с интервалом 14-20 дней; взрослым двукратно внутрикожно по 0,4 мл. с интервалом 14-20 дней. При повторной вакцинации иммунитет длится не менее 6 месяцев.

Клинически здоровым животным в рацион также ввели витамины, увеличили дачу щелочных кормов (костную золу или муку), корнеклубнеплоды, корма содержащие сахар.

Вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек крупного рогатого скота (историческая справка, характеристика возбудителя, особенности эпизоотологии, клиническое проявление и экономическое значение): Рекомендации / РАСХН, Сиб. отд-ние, ГНУ ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 2006.

Наставление по применению сыворотки против ИРТ, ПГ-3, вирусной диарей, сальмонеллёза, пастереллёза, диплококкоза, короновирусной инфекции крупного рогатого скота.

Временное наставление по применению вакцины «Тривак» поливалентной сухой ассоциированной.

Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных. А.Н. Куриленко, В.Л. Крупальник – М.: Колос, 2001.

В.А. Трушина Профилактика заболеваний сельскохозяйственных животных и птиц – М.: ООО «Аквариум-Принт», 2005.

Вирусная диарея крупного рогатого скота: симптомы и лечение

Добавить в избранное

Крупный рогатый скот при ненадлежащих условиях содержания нередко поражают инфекционные заболевания. Возбудителями этих заболеваний становятся патогенные вирусы, которые поселяются на слизистых оболочках животных. Одним из самых распространённых инфекционных заболеваний у скота считается вирусная диарея. В этой статье будут рассмотрены возбудитель и источник заражения этим заболеванием, протекание различных форм диареи, а также возможные способы лечения и принципы вакцинации.

• Что такое вирусная диарея
• Экономический ущерб
• Возбудитель и источник заражения
• Симптомы и течение болезни
  • Острая форма
  • Подострая
  • Абортивная (атипичная) форма
  • Хроническая
• Диагностика
• Патологоанатомические изменения
• Лечение
• Схема вакцинации
• Другие меры профилактики

Что такое вирусная диарея

Это вирусное инфекционное заболевание, стремительно передающееся от одной особи другой. Выражается в быстрой потере веса, диарее, сопровождающейся повышением температуры тела, респираторными нарушениями и лихорадкой.

При отсутствии лечения приобретает осложнения в виде поражения суставов конечностей, хромоты, воспаления роговицы глаз, стоматита. Сопровождается язвенным заболеванием пищеварительного тракта.

Экономический ущерб

Ущерб заключается в массовом падеже скота на обширных территориях. При отсутствии изоляции затрагивает не отдельное фермерское хозяйство, а целые области и регионы, поэтому потери оцениваются в масштабах государства.

Летальность заражённого скота составляет от 10 до 90 %, экономические потери оцениваются соответственно. При оценке потерь учитывается процент падежа, снижение продуктивности, неродившийся молодняк, затраченные на лечение средства.

Возбудитель и источник заражения

Возбудителем диареи становится вирус, относящийся к роду Пестивирус. Он выделяется из организма инфицированного животного вместе с мочой, слюной, калом и другими физиологическими выделениями. Родственен с африканской чумой свиней, поражает преимущественно молодняк.

Скот заражается контактно, через инфицированные корма, воду, оборудование. Переносчиками вируса могут быть люди, птицы, насекомые и грызуны.

Симптомы и течение болезни

Всего различается четыре формы течения этого заболевания, которые провоцируются одним и тем же вирусом. Формы протекания инфекции зависят от физиологического состояния животного, его возраста, восприимчивости и состояния окружающей среды, в которой оно находится.

Острая форма

Чаще всего развивается у молодняка — телят до двухмесячного возраста. Проявляется в виде сильного кашля, резкого повышения температуры тела до 41–42 градусов, угнетённого состояния, сонливости, апатии. Дыхание у инфицированных животных затруднённое и неглубокое, частота сердечных сокращений превышает норму в 1,5 раза.

На слизистой оболочке носовых ходов и ротовой полости наблюдаются изъязвления небольшого размера. Из носовых ходов произвольно вытекают слизистые выделения с гнойными примесями, присутствует сильное слезотечение и покраснение глаз.

Основным симптомом принято считать диарею с примесями кровяных сгустков, которая продолжается в течение двух и более дней.

Подострая

Развивается у тех животных, которые выработали определённый иммунитет к этому заболеванию. Симптомы в этом случае проявляются значительно слабее. Наблюдается субфебрильная температура тела, переменная апатия, ухудшение аппетита.

Слизистые оболочки поражены, но язвы на них менее выражены, отсутствует нарушение дыхательной функции. Кашель неглубокий, слизистые выделения из носовых путей незначительные. Изредка проявляется хромота как следствие воспалительных процессов в суставах и кратковременная диарея (до суток).

Абортивная (атипичная) форма

Протекает в полускрытой форме, чаще всего возникает у молодняка КРС в возрасте от четырёх до шести месяцев. Проявляется в виде слабо выраженной недлительной (до суток) лихорадки, ринита, изредка сопровождается слабой хромотой и диареей без кровянистых выделений.

Выздоровление наступает на четвёртые сутки после возникновения симптомов.

Хроническая

Характеризуется слабым проявлением признаков инфицирования, свойственна животным старше полугодовалого возраста со сформированным иммунитетом. Воспалительные процессы в ротовой полости отсутствуют, поражений суставов конечностей нет.

Возможна интервальная диарея с периодами улучшения самочувствия. Такое животное является активным и длительным носителем вируса, поэтому хроническая форма подлежит обязательному лечению.

Диагностика

Практикуется как лабораторная, так и симптоматическая. Для лабораторных исследований отбираются образцы внутренних органов (лимфоузлов, слизистых оболочек, кишечника) павшего молодняка. На исследование направляются смывы и соскобы слизистых оболочек инфицированных животных, проводится забор крови на общий анализ.

Пробы берутся дважды — после проявления симптомов и через три недели после начала лечения. Симптоматическая диагностика включает в себя осмотр слизистых оболочек нездорового скота, проверку его рефлексов, наблюдение за поведением.

Патологоанатомические изменения

Изменения анализируются после рассечения тела павшего инфицированного животного.

Чаще всего локализуются в пищеварительном тракте, но имеется и на других органах:

1. На слизистых оболочках ротовой, носовой полости и пищевода наблюдается гиперемия сосудов, эрозивные повреждения, поверхностные язвы различного размера.
2. Пищевод покрывается серо-коричневым налётом в тех местах, где возникают язвы.
3. В сычуге и рубце обнаруживаются точечные расширения сосудов, местные кровоизлияния.
4. Кишечник наполнен зловонными массами с включением кровяных сгустков и гнойных вкраплений.
5. Оболочки воспалены, присутствует отёчность и мелкие язвы, покрытые слизистым налётом.
6. Лимфатические узлы заметно увеличены по всему телу, печень имеет жёлтый или жёлто-оранжевый окрас.
7. Мочевыделительная система воспалена, почки увеличены, имеют дряблую мягкую структуру.

Лечение

Специфические средства для лечения разработаны не были. Возможно укрепление иммунитета инфицированного поголовья с помощью введения плазмы крови прежде болевших и выздоровевших животных. Облегчение протекания болезни допустимо путём вакцинации животных сывороткой от трахеита или аденовирусного заболевания КРС.

Дополнительные лечебные мероприятия включают предоставление питательных легкоперевариваемых кормов, обильное питьё и дачу антибиотиков для угнетения патогенной микрофлоры. Для внутримышечных введений чаще всего используются Левомицетин, Стрептомицин, Неомицин, Мономицин и Канамицин.

Практикуется промывание ротовой полости слабыми растворами марганцовки и введение в корма интерферона, выделенного из культур кишечной палочки.

Схема вакцинации

Телята, питавшиеся молоком от коров с приобретённым иммунитетом, обретают устойчивость к возбудителю диареи до месячного возраста. Вакцинирование проводится два раза в полгода с интервалом в 30 дней комплексными инактивированными вакцинами.

Используются препараты Комбовак и Нарвак против вирусной диареи, ротавирусной инфекции, лептоспироза, парагриппа и ринотрахеита.

Другие меры профилактики

Так как методы действенной борьбы с данным заболеванием разработаны не были, большое внимание в фермерских хозяйствах уделяется профилактическим мерам:

1. В первую очередь из стада удаляются инфицированные животные, организовывается их убой.
2. Утилизация падежа производится методом сожжения.
3. Хозяйство пересматривает рацион питания скота, увеличивает массовую долю в нём концентрированных кормов и витаминных добавок.
4. Проводятся плановые дезинфицирующие мероприятия. Особое внимание уделяется коровникам для тельных маток и стойлам с молодняком.
5. На входе в производственные помещения укладываются дезинфицирующие коврики, нейтрализующие часть патогенной микрофлоры и вирусов.
6. Один раз в неделю стойла для поголовья обрабатываются туманной взвесью йодного раствора или раствора уксусной кислоты.

Вирусная диарея — это контагиозное заболевание, которое стремительно поражает молодняк крупного рогатого скота. Форма его протекания зависит от физиологического состояния животного, его иммунитета, а также качества и частоты кормления.

Чтобы предупредить возникновение и распространение вирусной диареи, необходимо проводить регулярные профилактические мероприятия, а инфицированных животных переводить в карантин.

Вирусная диарея крупного рогатого скота (diarrhea vizalis bovum)

Вирусная диарея крупного рогатого скота (болезнь слизистых оболочек, мукозальная болезнь, инфекционная диарея крупного рогатого скота, инфекционный энтерит крупного рогатого скота, диарея новорожденных телят) (diarrhea vizalis bovum) — контагиозная болезнь преимущественно молодых животных, характеризующаяся эрозивно-язвенным воспалением слизистых оболочек пищеварительного тракта.

Зачастую возникает синдром респираторного заболевания, эрозивно-язвенный стоматит с хромотой, а также латентная инфекция коров, приводящая к острой инфекции плодов, вызывая их мумификацию, аборты, врожденные дефекты и диарею новорожденных телят.

Этиология. Возбудителем вирусной диареи крупного рогатого скота является РНК-геномный вирус, относящийся к семейству Flaviviridae, роду Pestivirus. Вирус имеет антигенное родство с вирусом классической чумы свиней пограничной болезни овец.

Эпизоотологические данные. Наряду с крупным рогатым скотом в естественных условиях к вирусной диарее восприимчивы буйволы, олени, косули, козы, овцы. У свиней инфекция протекает бессимптомно. Серологические исследования показали, что в полевых условиях вирус диареи инфицирует свиней, коз, буйволов, оленей , косуль, овец, беловежских зубров, красных оленей. Вирус диареи выделен от человека при наличии у него специфических антител. Имеются сообщения о возможности экспериментального заражения овец, коз, поросят и кроликов. Лабораторные животные — белые мыши, крысы, морские свинки, хомячки, собаки, кошки, цыплята, голуби устойчивы к заражению.

Основным источником возбудителя инфекции являются больные животные, выделяющие вирус во внешнюю среду со слюной, слезами, носовыми истечениями, мочой, фекалиями, спермой и молоком. Большую опасность представляют животные-вирусоносители с хроническим и латентным течением болезни. В клетках лимфоидной ткани переболевших животных вирус может персистировать (находиться) от 120 до 200 дней. Перезаражение происходит воздушно-капельным путем, при прямом контакте здоровых животных с больными, а также при поедании инфицированного корма.

Установлено внутриутробное заражение, а также через молоко больных матерей.

Вирусная диарея регистрируется в любое время года, но более тяжело она протекает поздней осенью и зимой. Возникновению болезни способствуют факторы, понижающие резистентность организма: переохлаждение, неполноценное и несбалансированное кормление, транспортировка и др.

Течение и симптомы. При переболевании крупного рогатого скота вирусной диареей наблюдаются различные формы течения болезни: энтеральная, респираторная, генитальная, абортивная, что зависит от вирулентности штамма, возраста и чувствительности животных, нали­чия неблагопри­ятных факторов внешней среды. Ряд авторов отмечали течение вирусной диареи с поражением кожи в виде дерматита в области межкопытной щели и вокруг венчика, струпьев на лицевой части головы и по всей поверхности тела. Установлена связь между инфекцией вирусной диареи с абортами у коров, диареей новорожденных и респираторных заболеваний у телят старше 3—4-месячного возраста. У взрослых животных вирусная диарея протекает в основном в хроническом и субклиническом проявлениях и сопровождается абортами, иммуносупрессией, персистентной инфекцией, появле­нием на свет слабого потомства.

Одним из путей передачи вирусной диареи и внутриутробного заражения является трансплантация эмбрионов. При этом поражаются как плоды крупного рогатого скота, так и репродуктивные органы коров. У телят, трансплацентарно инфицированных вирусом диареи, установили гипоплазию мозжечка и водянку головного мозга. Молодняк, полученный от коров, вакцинированных между 90 и 118 днями стельности, имел поражения центральной нервной системы: атаксию, искривление шеи, астазию, опистотонус.

Диагноз ставят комплексно на основании клинико-эпизоотологических данных, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований Лабораторная диагностика на вирусную диарею включает в себя проведение следующих исследований: выявление специфического антигена из биологического материала с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) или иммунофлуоресценции (МФА), выделение вируса на культуре клеток и его идентификация в реакциях нейтрализации (РН) и торможения непрямой гемагглютинации (РТНГА). Сюда же входит реакция связывания комплемента (РСК), иммуноферментный анализ (ИФА), а также ретроспективная диагностика с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), иммуноферментного анализа (ИФА), нейтрализации (РН), связывания комплемента (РСК).

Дифференциальный диагноз. Вирусную диарею дифференцируют от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, аденовирусной инфекции, хламидиоза, пастереллеза, респираторно-синтициальной инфекции.

Лечение. Для лечения используют гипериммунные сыворотки и сыворотки реконвалесцентов, в которых имеются антитела к вирусу диареи одновременно с антибактериальными и иммуностимулирующими препаратами. Применяют также симптоматические методы лечения.

Профилактика и меры борьбы. Для специфической профилактики используют живые и инактивированные моно- и ассоциированные вакцины, гипериммунные сыворотки. Для ликвидации заболевания используют общие противоэпизоотические мероприятия – ограничение движения скота, дезинфекция, карантинирование больных животных.

Выделение и идентификация вируса вирусной диареи крупного рогатого скота 3-го типа в животноводческом хозяйстве Российской Федерации

Журнал “Ветеринария” №7 2021

Ольга Александровна Акимова, научный сотрудник,

Антон Геннадьевич Южаков, к.б.н., начальник отдела, ,

Марина Александровна Корицкая, к.в.н., ведущий специалист

Евгений Валерьевич Иванов , к.б.н., ведущий научный сотрудник, doctor2112@yandex.ru

Голда Артуровна Джавадова , специалист по диагностическим

ООО «Ветбиохим » (Москва , Россия)

Александр Гаврилович Глотов, д.в.н., профессор, заведующий лабораторией,

Татьяна Ивановна Глотова, д.б.н., профессор, главный научный сотрудник,

ФГБУН Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий РАН (СФНЦА РАН), Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока (пос . Краснообск, Новосибирская обл., Россия).

Олег Анатольевич Верховский, д.б.н., профессор, заведующий отделом,

АНО «Научно -исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных» (Москва , Россия)

Тарас Иванович Алипер, д.б.н., профессор, aliper@vetbio.ru

ООО «Ветбиохим » (Москва , Россия)

Вирусная диарея крупного рогатого (ВД КРС) – инфекционная контагиозная болезнь, характеризующаяся многообразием клинической картины, в основном воспалениями и язвами на слизистых оболочках пищеварительного тракта, диареей, лихорадкой, поражениями репродуктивной системы животных. Заболевание наносит значительный экономический ущерб животноводству, связанный с абортами, рождением мертвых телят или с врожденными пороками развития, а также персистентно инфицированных (ПИ ) животных [1, 2, 18].

Согласно современной классификации возбудителями ВД КРС, являются 3 вида (типа ) вирусов относящихся к семейству Flaviviridae, роду Pestivirus: Pestivirus A ( BVDV1, ВВД 1), Pestivirus B ( BVDV2, ВВД 2) и Pestivirus H ( HoBiPeV, BVDV3, Hobi-like, ВВД 3). Геном пестивирусов представлен однонитевой РНК положительной полярности, длиной 12,3 тыс. нуклеотидов. Вирионы имеют сферическую форму, их диаметр от 40 до 60 Нм [13, 15]. Они содержат четыре структурных белка: основной белок ядра нуклеокапсида С (14 кДа) и три гликопротеина оболочки – E rns (gp44 / 48), E1 (gp33 ) и E2 (gp55 ). Все три гликопротеина представлены в виде межмолекулярных дисульфидно-связанных комплексов: гомодимеры E rns , гетеродимеры E1 – E2 и гомодимеры E2. Геном пестивирусов кодирует 8 неструктурных (NS ) белков, среди которых N pro (23 кДа), p7 (7 кДа) и NS2 (40 кДа) не являются необходимыми для репликации РНК [8].

Вирусы ВД 1 и ВД 2 КРС – типичные и хорошо известные пестивирусы. В отличие от них вирус ВД 3 относится к группе атипичных пестивирусов крупного рогатого скота, до настоящего времени они практически не изучены в качестве инфекционного этиологического агента ВД КРС. Вирус ВД 3 впервые обнаружили в изготовленной в Бразилии партии эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота, используемой в биологической промышленности [19, 21]. Затем его выявили в зараженной культуре клеток и крови буйвола в Южной Америке [20]. В Италии в 2010 г. вирус выделили от телят во время вспышки респираторной болезни и при персистентной форме инфекции [10]. В Бразилии и Китае описаны случаи респираторного заболевания у телят, вызванные вирусом ВД 3 [14], характеризующиеся не только респираторным синдромом, но и кишечными проявлениями, а также высокой летальностью [16].

Пути передачи вируса ВД 3 разнообразны и аналогичны другим пестивирусам крупного рогатого скота. Возбудитель может передаваться горизонтально воздушно-капельным или фекально-оральным способом, а также вертикально от матери потомству. Подтверждены случаи распространения ВВД 3 при массовом применении живых вакцин, для изготовления которых случайно могли использовать контаминированную эмбриональную сыворотку крови [12, 16]. Итальянские ученые при исследовании in vitro показали, что вирус ВД 3 может реплицироваться в тех же культурах клеток, что и типичные пестивирусы крупного рогатого скота, без проявления цитопатического действия [17].

Широкое распространение вируса ВД 3 в мире через контаминированные вакцины и ветеринарные препараты, а также его способность вызывать поражения респираторной и репродуктивной систем, заставляют пристально следить за данным возбудителем.

Настоящая работа посвящена впервые обнаруженному и идентифицированному вирусу ВД 3 при вспышке заболевания на животноводческом комплексе одного из хозяйств Российской Федерации, разработке тест-системы ПЦР в режиме «реального времени» (ПЦР -РВ) для выявления вирусной РНК и молекулярно-биологической характеристике выделенного возбудителя.

Материалы и методы. На молочной ферме с поголовьем 600 дойных коров в одном из хозяйств Новосибирской области РФ исследовали телят 3 – 5-месячного возраста с клиническими признаками респираторного заболевания. От вынуждено убитых особей отобрали пробы патологического материала: кусочки селезенки, подчелюстных, средостенных лимфатических узлов и легких. При их транспортировке соблюдали температурный режим.

Диагностические ПЦР на наличие РНК вирусов ВД КРС, парагриппа типа 3 крупного рогатого скота (ПГ -3), ДНК вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (ИРТ КРС) осуществляли с помощью соответствующих коммерческих тест-систем по методике производителя (Ветбиохим , Россия). Наличие РНК респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота (РС КРС), коронавируса крупного рогатого скота (КВ КРС) и ротавируса крупного рогатого скота (РВ КРС) контролировали по ранее описанным методикам [4 – 6].

Фрагменты генома для секвенирования амплифицировали при помощи ранее написанных олигонуклеотидных праймеров VD-F 5’-TTA AGCCCTGAGTACAGGG-3’ (позиции 170 – 188 по штамму NADL), VD-R 5’-TTTGTTTGTATGTTTTGTAT-3’ (позиции 431 – 412 по штамму NADL), фланкирующих консервативный регион вирусного генома размером 261 пар оснований. ОТ-ПЦР проводили в конечном объеме 25 мкл. Реакционная смесь содержала 5 мкл выделенной РНК, 10 пМ каждого праймера, 0,25 мM каждого dNTP, 1,25 ед. Taq-полимеразы, 0,5 ед. M-MLV ревертазы, 20 ед. ингибитора рибонуклеаз RNAzin, 10 мM Tris-HCl (рН 9,0), 50 мM KCl, 0,1% Triton X-100, 1,5 мM MgCl ₂ . Температурный режим реакции: 50 0 С – 30 мин, 94 0 С – 5 мин 1 цикл, 94 0 С – 20 с, 50 0 С – 20 с, 72 0 С – 20 с 30 циклов, 72 0 С – 5 мин. Продукты ПЦР анализировали в 1%-ном агарозном геле в трис-ацетатном буфере. Полученный фрагмент вырезали и изолировали из геля при помощи набора LumiPure для выделения ДНК из агарозного геля и реакционных смесей (Lumiprobe , Россия) по методике производителя. Секвенирование осуществляли с тех же праймеров. Анализировали последовательности с помощью пакетов программ: LaserGene 11.1.0. (DNASTAR , США) и MEGA 7.0.18 (MegaSoftware , США).

Из патологического материала, в котором обнаружили геном вируса ВД 3, готовили 10%-ную суспензию на фосфатно-буферном растворе (рН 7,2 – 7,4) с добавлением антибиотиков пенициллина (400 ед/мл), стрептомицина (300 ед/мл) и канамицина (100 ед/мл) и центрифугировали 30 мин при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость фильтровали с использованием фильтрующего элемента с диаметром пор 0,22 мкм. [3] Полученным материалом заражали первичную культуру клеток почки теленка (ПТ ), субкультуры тестикул бычка, тестикул козла, тестикул ягненка (ТЯ ), перевиваемую линию клеток почки крупного рогатого скота (MDBK ) и перевиваемую линию клеток сердца теленка (КСТ ). Клетки выращивали в монослое методом стационарного культивирования с применением питательной среды ДМЕМ (HyClone , США) и добавлением 10%-ной эмбриональной сыворотки крови КРС (FBS HyClone, США). Монослой клеток, сформированный на 80 – 90%, промывали солевым раствором Хэнкса, инокулировали 500 мкл вирусной суспензии и инкубировали 1 ч при 37 0 С для адсорбции вируса. После этого инокулят удаляли и вносили поддерживающую среду ДМЕМ с добавлением 1% эмбриональной сыворотки крови КРС (FetalClone III, HyClone, США). За инфицированными культурами клеток наблюдали в течение 5 суток.

При разработке праймеров и зондов для детекции РНК ВД 3 использовали 66 полных геномов вирусов ВД из базы данных GenBank: 20 – ВД 3, 23 – ВД 1 и 23 – ВД 2. Нуклеотидные последовательности каждого вида выравнивали относительно друг друга, на этой основе сгенерировали консенсусные последовательности, используемые для подбора праймеров и зондов.

Результаты исследований и обсуждение. В ноябре 2020 г. на молочной ферме Новосибирской области РФ зафиксировали респираторное заболевание молодняка крупного рогатого скота. У телят отмечали угнетение, обильное слюнотечение, образование пенистой массы вокруг ротовой полости и белый налет на языке. В дальнейшем у них развивался конъюнктивит, наблюдали выделение серозного и гнойного экссудата из носовой полости (рис . 1). Края носового зеркала покрывались трескающимися корочками. При этом температура тела была в пределах нормы, аппетит сохранен. Спустя 2 – 3 недели у некоторых животных развивалась диарея. Зарубежные исследователи в своих работах описывают сходный комплекс симптомов у заболевшего молодняка [11].

Рис. 1. Клинические признаки у теленка

При исследовании образцов патологического материала вынужденно убитых телят методом ПЦР выявили РНК вируса ВД (без видовой дифференциации), геномы вирусов РС, ПГ-3, КВ, РВ и ИРТ КРС не обнаружили. Для идентификации и генотипирования вируса образцы, содержащие РНК вируса ВД КРС, использовали для амплификации и последующего секвенирования фрагмента генома, содержащего участок 5’ НТО и участок гена N pro вируса ВД КРС для определения его вида. Анализ полученной последовательности в программе BLAST показал, что исследуемый геном принадлежит вирусу ВД КРС 3 типа, а филогенетически установили, что наиболее близкими к нему являются штаммы вируса ВД 3 из Италии и Бразилии (рис . 2). В связи с этим, нами был сделан вывод, что этиологическим агентом, вызвавшим заболевание телят, является вирус ВД КРС 3 типа.

Рис. 2. Филогенетическая дендрограмма, основанная на фрагменте генома вирусов ВД

Для выявления РНК вируса ВД 3 КРС разработали тест-систему ПЦР-РВ, с этой целью на основе консенсуной последовательности геномов ВД-3 выбрали следующие праймеры и зонд к ним: BVDV3 F (5 ’-CAGTGAGCTCCTTGGATTA- 3′); BVDV3 R (5 ’-ACCCTCTTTCACCCAAG- 3′) и BVDV3 Probe (FAM -ATGCCTCGAGATGCCATGTGGA-BHQ1). Консенсусные последовательности ВД 1 и ВД 2 использовали для теоретического исключения ложноположительных реакций с данными вирусами. Для достижения максимальной чувствительности оптимизировали состав ПЦР смеси и температурные условия реакции. В дальнейшей работе реакционная смесь для ПЦР (в конечном объеме 25 мкл) содержала 5 мкл выделенной РНК, 10 пМ каждого праймера, 5 пМ зонда, 0,25 мM каждого dNTP, 1,25 ед. Taq-полимеразы, 0,5 ед. ревертазы M-MLV, 20 ед. ингибитора рибонуклеаз RNAzin, 50 мM Tris-HCl (рН =8,3), 75 мM KCl, 10 пМ DTT, 3 мM MgCl ₂ . Оптимальный температурно-временной режим для ПЦР-РВ был следующим: 1 цикл – 50 0 С − 30 мин, 94 0 С − 5 мин; 5 циклов – 94 0 С − 10 с, 50 0 С − 20 с, 72 0 С − 10 с; 40 циклов – 94 0 С − 10 с, 50 0 С* − 20 с, 72 0 С − 10 с ( * – измерение уровня флуоресценции).

Специфичность тест-системы проверяли с помощью панели положительных и отрицательных контрольных образцов, включающих культуры клеток Vero и MDBK, инфицированные вирусами ВД 1, ВД 2, ВД 3, ПГ-3, РС и коронавирусом КРС. В результате установили, что в разработанной тест-системе специфично выявляется РНК ВД 3 КРС, при отрицательной реакции с гетерологичными образцами. Таким образом, было показано, что ПЦР-РВ является чувствительным и специфичным тестом, пригодным для идентификации и мониторинга вируса ВД 3 КРС.

При изучении биологических свойств идентифицированного вируса ВД 3 использовали ряд первичных и перевиваемых культур клеток. Так как за время наблюдения цитопатических изменений не обнаружили, то для оценки размножения вируса в культурах клеток применили разработанную нами методику ПЦР-РВ. Размножение вируса ВД 3 отмечали в культурах клеток MDBK (2 – и 3-й пассаж) и ПТ (1 – и 3-й пассаж), его не удалось зарегистрировать в других культурах клеток. Необходимо отметить, что впервые накопление вируса ВД 3 в культуре клеток MDBK было описано N. Decaro et al. [9].

Заключение. Впервые в Российской Федерации был выделен и идентифицирован вирус ВД 3, установлена его этиологическая роль в возникновении и распространении ВД КРС. Филогенетический анализ участка последовательности генома обнаруженного возбудителя показал, что наиболее близкими к нему являются изоляты вируса ВД 3 из Италии и Бразилии. Выделенный вирус размножается в культурах клеток MDBK и ПТ. Разработана высокоэффективная тест-система на основе ПЦР-РВ для диагностики и мониторинга ВД КРС, вызываемой 3 типом возбудителя, а также для контроля применяемых живых вакцин на отсутствие контаминации вирусом ВД 3 типа.

1. Бессарабов Б. Ф., Вашутин А. А., Воронин Е. С. и др. Инфекционные болезни животных. Под ред. А. А. Сидорчука. М.: КолосС, 2007; 671 с.
2. Глотов А. Г., Глотова Т. И. Атипичные пестивирусы крупного рогатого скота. Сельскохозяйственная биология. 2015; 50 (4 ):399 – 408.
3. Дьяконов Л. П., Ситьков В. И. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) М.: Компания Спутник +, 2000; 400 с.
4. Кудрявцев В. А., Дороненкова Г. Н., Аянот П. К.. Методика выявления и штаммовой дифференциации коронавируса КРС с помощью ПЦР и секвенирования фрагмента S гена. ФГУ «ВНИИЗЖ ». Владимир, 2003; 9 с.
5. Нестеров А. А., Белый А. С. Методические рекомендации по выявлению РНК вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. ФГБУ «ВНИИЗЖ ». Владимир, 2020; 21 с.
6. Хаметова К. М., Алексеев К. П., Южаков А. Г., Костина Л. В., Раев С. А., Мусиенко М. И., Мухин А. Н., Алипер Т. И., Воркунова Г. К., Гребенникова Т. В. «Молекулярно -биологические свойства клонированного штамма Wa ротавируса а человека» Вопросы вирусологии, 2019, 64 (1 ): 16-22.
7. Bauermann F. V., Ridpath J. F., Weiblen R., Flores E. F. HoBi-like viruses: an emerging group of pestiviruses. J. Vet. Diagn. Invest. 2013; 25 (1 ):6 – 15. DOI:10.1177/1040638712473103
8. Daniel Aberle, Claudia Muhle-Goll, Jochen Bürck, Moritz Wolf, Sabine Reißer, Burkhard Luy, Wolfgang Wenzel, Anne S. Ulrich, Gregor Meyers. Structure of the Membrane Anchor of Pestivirus Glycoprotein Erns, a Long Tilted Amphipathic Helix. February 27, 2014.
9. Decaro N., Mari V., Lucente M. S., Sciarretta R., Moreno A., Armenise C., Losurdo M., Camero M., Lorusso E., Cordioli P., Buonavoglia C. Experimental infection of cattle, sheep and pigs with ‘Hobi’-like pestivirus. Vet Microbiol. 2012; Mar 23; 155 (2 – 4):165 – 171. DOI: 10.1016/j.vetmic.2011.08.030. Epub 2011 Sep 3.
10. Decaro N., Lucente M. S., Mari V. Atypical pestivirus and severe respiratory disease in calves. Europe. Emerg. Infect. Dis. 2011; 17:1549 – 1552. DOI: 10.3201/eid1708.101447
11. Fernando V. Bauermann et al. Anim Health Res Rev. HoBi-like viruses-the typical ‘atypical bovine pestivirus’. 2015; Jun.
12. Fernando V. Bauermann, Julia F. Ridpath, Rudi Weiblen, Eduardo F. Flores. HoBi-like viruses: an emerging group of pestiviruses. Department of Preventive Veterinary Medicine, Virus Section, Federal University of Santa Maria, Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil. 2013. https://doi.org/10.1177/1040638712473103
13. H. Laude. Nonarbo-togaviridae: comparative hydrodynamic properties of the pestivirus genus. 1979.
14. Ingrid Bortolin Affonso Lux Hoppe, Andressa de Souza-Pollo, Andréa Souza Ramos de Medeiros, Samir Issa Samara, Adolorata Aparecida Bianco Carvalho. Adolorata Aparecida Bianco Carvalho. HoBi-like pestivirus infection in an outbreak of bovine respiratory disease. Universidade Estadual Paulista-Unesp, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Reprodução Animal, Via de Acesso Professor Paulo Donato Castellane, s/n°, CEP: 14.884 – 900 Jaboticabal, São Paulo, Brazil. 2019.
15. King A. M.Q., Lefkowitz E.J., Mushegian A.R., Adams M. J., Dutilh B. E., Gorbalenya A. E., Harrach B., Harrison R. L., Junglen S., Knowles N. J. et al. Changes to taxonomy and the International Code of Virus Classification and Nomenclature ratified by the International Committee on Taxonomy of Viruses. Arch. Virol. 2018; 163:2601 – 2631.
16. Meng Chen, Mengda Liu, Sidang Liu, Yingli Shang. HoBi-like pestivirus infection leads to bovine death and severe respiratory disease in China. College of Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, China. Shandong Provincial Key Laboratory of Animal Biotechnology and Disease Control and Prevention, Shandong Agricultural University, Taian, China., Laboratory of Zoonoses, China Animal Health and Epidemiology Center, Qingdao, China., Institute of Immunology, Shandong Agricultural University, Taian, China. 2020.
17. Nicola Decaro. HoBi-Like Pestivirus and Reproductive Disorders. Department of Veterinary Medicine, University of Bari Aldo Moro, Valenzano, Italy. 2020
18. Pinior B., Garcia S., Minviel J. J., Raboisson D. Epidemiological factors and mitigation measures influencing production losses in cattle due to bovine viral diarrhoea virus infection: A meta-analysis. Transbound. Emerg. Dis. 2019; 66:2426 – 2439.
19. Schirrmeier H., Strebelow G., Depner K., Hoffmann B., Beer M. Genetic and antigenic characterization of an atypical pestivirus isolate, a putative member of a novel pestivirus species. J. Gen. Virol. 2004.
20. Stalder H., Meier P., Pfaffen G., Wageck-Canal C., Rüfenacht J., Schaller P. et al. Genetic heterogeneity of pestiviruses of ruminants in Switzerland. Prev. Vet. Med. 2005; 72:37 – 41. 10.1016/j.prevetmed.2005
21. Victor Riitho, Rebecca Strong, Magdalena Larska, Simon P. Graham and Falko Steinbach Bovine Pestivirus Heterogeneity and Its Potential Impact on Vaccination and Diagnosis Reprinted from. Viruses. 2020; 12:1134. DOI:10.3390/v12101134

105120, г. Москва,
3-й Сыромятнический пер., д. 3/9, стр. 2

Вирусная диарея крупного рогатого скота, значение и контроль заболевания на предприятии

Первое описание симптомов вирусной диареи КРС было сделано в США в середине пятидесятых годов прошлого века. При этом регистрировалась сильная диарея, воспаление слизистых оболочек ротовой полости и пищеварительного тракта. В дальнейшем подобные признаки болезни были документированы в Северной Америке и Англии, причем у взрослых животных заболевание сопровождалось абортами, а у молодняка смертностью до 50%.

Вследствие недостаточного внимания к проблеме вирусной диареи КРС в настоящее время заболевание во многих точках мира приобрело пандемический характер, а количество серологически положительных животных достигает 80%. 6 Серологические исследования в 29 штатах США выявили 58% положительного поголовья. Данные исследований в 15 регионах Российской Федерации за 2008 говорят о более чем 90% положительного поголовья. Это обозначает, что практически каждое хозяйство в России поражено и несет значительные экономические убытки.

Отдельной темой при изучении этого заболевания является передача вируса и формы течения болезни. Так если корова была отрицательна по заболеванию, но инфицировалась между 30 и 125 днями стельности, она может не заболеть, но передаст вирус трансплацентарно плоду. В другом случае плод инфицируется от вирус-положительной матери. При этом некоторые телята выживают, приобретая иммунную толерантность к вирусу, и остаются персистентно инфицированными (ПИ) в течение всей жизни. Эти ПИ животные выделяют большое количество вируса в окружающую среду и являются основным источником вирусной диареи на производстве.

Поэтому основной упор при осуществлении программ эрадикации этого заболевания делается на диагностику и удаление ПИ животных из стада для предотвращения передачи вируса другим здоровым животным.

По данным многочисленных исследований по всему миру распространенность ПИ животных оценивается приблизительно от 0,1% до 2%. Однако, несмотря на низкий процент, риск введения ПИ животных в стадо достаточно высок, а дальнейшее распространение вируса и инфицирование здоровых животных очень велико. Например, если вы приобретаете животных из стада численностью 500 голов КРС, в котором имеются всего 0,3% ПИ животных, у вас есть 77,7% вероятность покупки по крайней мере одного ПИ животного.

Точных данных о величине экономических потерь от этого заболевания у предприятий в России нет. Но имеются много зарубежных исследований по оценке экономических последствий для хозяйств мясного и молочного направлений выращивания КРС. Последние исследования на крупных откормочных площадках в США в Канзасе говорят о серьезном негативном влиянии заболевания как на среднесуточный привес, так и на общие затраты в производстве.

В таблице 1 обобщенны основные выводы из различных статей и презентаций и представлены экономические потери, колеблющиеся в диапазоне от 10$ до 80$ USA (от 300 до 2650 руб.) на одно больное животное.

К приведенным выше факторам экономических потерь при этом заболевании, таким как аборты, мертворождения телят и их повышенная заболеваемость, необходимо добавить задержку прихода коров в охоту, снижение производства молока, его качества (увеличение соматических клеток в молоке) и учащение случаев мастита.

При исследовании 870 стад было выявлено, что количество соматических клеток в молоке напрямую зависело от экспозиции животных вирусу диареи КРС. Из приведенного графика 1 видно, что количество соматических клеток в молоке инфицированных стад было на 26% больше чем в здоровых стадах.Также отмечается большая разница при исследовании надоев и состава молока. Как видно из графика 2 объемы надоев, а также жирность и уровень белка в молоке у ПИ первотелок были практически в два раза ниже, чем у здоровых животных.

Рассмотрим коротко этиологию, патогенез и клинику заболевания.

Данное заболевание вызывается двумя типами вируса, различающимися по способности вызывать цитопатический эффект в культуре клеток: цитопатогенный и не цитопатогенный тип. Оба типа вируса могут одновременно циркулировать в стаде. Каждый из этих типов подразделяется на первый и второй генотипы, которые различаются между собой генетически.

На том основании, что оба типа вируса могут одновременно выделяться у одного и того же животного, причем цитопатогенный тип выделяется всегда вместе с не цитопатогенным, высказывается предположение о переходе не цитопатогенного типа вируса в цитопатогенный при возможной рекомбинации вирусной и клеточной РНК. При этом цитопатогенный тип отличается выработкой дополнительного р80 протеина, который и отвечает за разрушающее цитопатическое действие на структуры клетки хозяина. Несмотря на то, что не цитопатогенный тип вируса не экспрессирует р80 протеин, его второй генотип, вызывает особенно выраженное острое и тяжёлое течение болезни.

Инкубационный период длится от 2 дней до 2 недель. Учитывая тропизм вируса диареи к быстроразмножающимся клеткам, в том числе к клеткам плода, органов размножения, дыхания, иммунной системы и желудочно-кишечного тракта, выделяют энтеральную, респираторную, генитальную и абортивную форму течения заболевания. В результате воздействия вируса на клетки происходит их дегенерация и нарушение функций, обуславливающее нарушение обменных процессов в организме.

По клиническим признакам различают острое, подострое, хроническое и латентное течение болезни.

Острое течение наблюдается в основном в начале эпизоотического процесса и преимущественно среди молодняка. Оно характеризуется резким подъёмом температуры тела до 42°С, угнетенным состоянием, отказом от корма, учащением дыхания и тахикардией. Примерно через сутки – двое наблюдается повторный подъём температуры тела и в это время у животных отмечаются гиперемия слизистых носа, ротовой полости, дёсен, твёрдого нёба, спинки и краев языка. При этом также наблюдается язвенный стоматит, эрозии слизистых, носовое истечение, переходящее из слизистого в слизисто-гнойное. Иногда при остром течении регистрируется катаральный конъюнктивит, сопровождающийся помутнением роговицы, хромота, а также дерматит в области межкопытной щели и вокруг венчика. Сильная диарея, отказ от корма, истощение ведут в большинстве случаев к гибели в течение от 2 дней до 4 недель.

При подостром течении наблюдаются те же признаки, только более сглаженные. Если животное выживает, то болезнь переходит в хроническую форму. При этом взрослые животные характеризуются сниженной продуктивностью, плохой усвояемостью корма, а молодняк доживает примерно до полутора лет. 10

При латентном течении болезнь протекает бессимптомно, и ее обнаруживают по наличию в сыворотке крови и молоке специфических антител. Такое течение у стельных коров приводит примерно в 50% к абортам, мертворождениям, диареи новорождённых телят и является наиболее опасной формой для распространения и передачи вируса другим животным.

Диагноз на вирусную диарею КРС ставится комплексно. Эффективной специфической терапии не разработано. В качестве специфической профилактики можно проводить вакцинацию поголовья, что снижает риск возникновения заболевания, но, к сожалению, не обеспечивает полную защиту от инфекции. Кроме того взрослые животные, будучи иммунизированными, могут при инфицировании передавать возбудитель трансплацентарно плоду, который не имеет какой-либо защиты. Тем самым может поддерживаться наличие ПИ животных в стаде.

В качестве мер борьбы и профилактики рекомендуется поголовное тестирование, удаление из стада и убой выявленного ПИ скота, снижение плотности популяции и проведение ограничительных мероприятий.

Рекомендуемые действия при обнаружении положительных животных:
– Если имеются телята, подозреваемые как ПИ животные, их нужно направить на вынужденный убой или поместить в изоляцию до получения результатов второго подтверждающего теста.

– Если статус теленка подтвержден как ПИ животного, его необходимо сразу удалить как основной источник вируса диареи КРС.

– Корова, принесшая ПИ теленка должна быть исследована, т.к. есть вероятность, что она также является персистентно инфицированной..
– Необходимо сотрудничать с соседними предприятиями и ветеринарными специалистами и заменить поставщика животных с целью выявления и минимизации риска введения дополнительных положительных животных в стадо.

При наличии заболевания в поголовье необходимо разработать стратегию и последовательно провести программу эрадикации заболевания. Важным моментом при этом является комплексный подход и сотрудничество с соседними предприятиями.

– Необходимо рассмотреть имеющиеся риски распространения инфекции и определить цели программы.

– Переводите в основное стадо только ПИ отрицательных животных. Телята от закупленного стельного скота должны быть отрицательными в тестах, прежде чем и мать и теленок будут переведены в основное стадо.

– Для определения ПИ животных существует большое количество тестов; обсудите с ветеринарным врачом и диагностической лабораторией наилучшую стратегию тестирования в вашей ситуации.

– Перед осеменением необходимо тестировать всех нетелей, абортировавших коров, а также коров с не подтвержденной стельностью и потерявших теленка по каким-либо причинам, если они не были тестированы ранее.

– Изолируйте стельных коров, пока не произойдет отел и телята не смогут быть протестированы.

– В некоторых стадах телят необходимо тестировать ежегодно.

– Перед осеменением проверьте всех быков и ремонтных телок (полученных на предприятии или приобретенных), которые не были тестированы и ПИ статус неизвестен.

– Ведите четкую документацию результатов исследований.

– Разработайте программу вакцинации, которая будет предусматривать тип вакцины и сроки вакцинации. Она должна включать в себя вакцинацию быков, молодняка, нетелей и взрослых коров для оптимальной защиты плода.

Как уже говорилось выше – основным методом борьбы является определение больных и ПИ животных и удаление их из стада. Чем раньше будут установлены эти животные, тем меньшие экономические потери понесет предприятие.

При этом можно использовать следующие лабораторные методы для определения наличия вируса

– Иммуноферментный анализ (ИФА),

– Изоляция вируса на культуре клеток,

Метод ИФА является на сегодняшний день основным и самым распространенным, т.к. позволяет быстро и недорого тестировать большие объемы проб, снимает необходимость выделения вируса в культуре клеток и разрешает получать точные результаты исследований при условии высокой чувствительности и специфичности применяемого теста. Этот метод используется для тестирования проб цельной крови, сыворотки, плазмы крови, лейкоцитов из периферийной крови, носовых смывов, клеток из клеточной культуры, а также проб ушной ткани.

В распоряжении ветеринарных специалистов и лабораторий имеются различные тесты ИФА для диагностики вирусной диареи КРС. Эти тесты, кроме BVDV Ag Point-of-Care теста, предназначены для использования в лаборатории и отвечают различным требованиям, в том числе требованиям международного стандарта ISO. Исходя из ситуации, можно подобрать соответствующий тест. При этом учитывается: что необходимо определить – антиген или антитела, какой исследуемый материал используется и какое количество проб необходимо тестировать. В зависимости от протокола постановки теста результат может быть готов уже в течение двух часов. При этом все тесты обладают высоким показателями специфичности и чувствительности и позволяют точно определять является ли животное вирусоносителем.

Тесты IDEXX позволяют быстро и качественно проводить полный скрининг стада и дают ценную информацию для разработки программы вакцинации и биозащиты поголовья.

Особого внимания среди приведенных тест-систем заслуживает BVDV Ag Point-of-Care тест.

Этот экспресс тест позволяет получать качественные результаты исследования в течение 15 минут, а набор включает в себя одноразовые тесты, в виде небольшой пластиковой пластины, пипетки и буфер, необходимые для проведения анализа. Как показано в таблице 2, в этом тесте в качестве исследуемого материала можно использовать целый спектр различных проб, что очень удобно и просто.

Сам тест очень неприхотлив при хранении (требуемая температура от +2°С до +30°С) и прост в постановке. В первую очередь он предназначен для использования непосредственно на ферме или в поле при рабочей температуре от +10°С до +40°С. При этом не затрачивается ни какого времени на пересылку проб в лабораторию и ожидание результатов, так как результат можно читать незамедлительно. Это позволяет делать быстрые выводы и принимать соответствующие решения. В следующей таблице 3 пошагово представлено проведение POC теста.

В регионах, где нет лаборатории с возможностью постановки ИФА, этот тест имеет решающее значение. В силу простоты его может провести любой рядовой сотрудник без особых навыков и знаний, а быстрота получения результатов делает его незаменимым.

Например, этот тест очень удобен для диагностики новорожденных телят, определения персистентно инфицированных животных, незаменим для быстрого установления статуса по заболеванию животного перед его продажей, покупкой, перевозкой или перегруппировкой. Тест позволяет быстро подтвердить или опровергнуть подозрение на заболевание, при схожих клинических признаках, гибели животного, произошедшем аборте или мертворождении.

Таким образом, ветеринарные специалисты и лабораторные сотрудники имеют прекрасную возможность выбора подходящего теста для диагностики вирусной диареи, и борьбы с этим заболеванием, а сотрудники IDEXX и представители фирмы готовы оказать консультационную и техническую поддержку.

Хотите получить скидку 5 % на продукцию компании IDEXX?

Звоните по телефонам: +7 (800) 500 3585 или +7 (495) 120 7787 и назовите код скидки – ВЕРУМБИО321DMA

Акция действительна до 30 апреля 2021 года.

Польза и вред виноградного сока для организма

Натуральный виноградный сок вкусен и полезен, он содержит в себе массу витаминов и микроэлементов. Такой напиток можно употреблять и тем, кто опасается есть сам виноград из-за его калорийности. В чём заключается его основная польза и чем он может быть вреден?

Из чего состоит виноградный сок

Разумеется, речь не идёт о заводских соках, в которых от натуральной ягоды в лучшем случае порошок. Пользы в них практически не остаётся, а в составе появляются красители и консерванты. Свежевыжатый сок винограда содержит следующие компоненты:

1. Фруктовая вода. В ягодах воды до 80%, в ней растворены все полезные вещества.
2. Сахара. Легко и быстро усваиваются организмом, почти моментально всасываясь в кровь. Являются главным источником энергии и бодрости на день. Кроме того, сахар необходим для работы мозга. Несмотря на наличие сахаров, виноградный сок диетический продукт и при умеренном употреблении не принесёт вреда фигуре и даже ускорит процесс похудения.
3. Органические кислоты. Важный компонент для стимуляции обменных процессов в организме. Кислоты также помогают поддерживать кислотно-щелочной баланс.
4. Биофлавоноиды. В виноградном соке их очень много, эти вещества необходимы для нейтрализации негативного воздействия токсинов. Природные антиоксиданты замедляют старение клеток.
5. Дубильные вещества. Оказывают профилактическое действие на воспалительные процессы в ЖКТ.
6. Витамины. Больше всего в винограде содержится витаминов B, C, E и PP.
7. Калий. Улучшает работу сердечно-сосудистой системы и почек, помогает выводить лишнюю жидкость из организма.
8. Магний. Необходим для нормальной работы нервной системы, укрепляет иммунитет и общее состояние организма. Вместе с калием один из незаменимых помощников для сердца.
9. Железо. Повышает уровень гемоглобина в крови и насыщаемость тканей кислородом.
10. Другие минералы. Марганец, кальций, цинк и кремний участвуют в работе гормональной системы.

Как видно из списка, виноградный сок богат на активные вещества. Это одновременно и польза, и вред, поскольку в излишних количествах полезные витамины и микроэлементы могут повредить здоровью и привести к неприятным последствиям. Чтобы извлечь только пользу, нужно знать, как и в каких количествах правильно употреблять напиток.

Чем полезен

Свежий натуральный сок из качественных ягод и в умеренных количествах принесёт только пользу. Регулярное употребление этого напитка способствует улучшению общего состоянии организма. Чем полезен сок из ягод винограда:

• Снижает уровень вредного холестерина. За счёт этого улучшается работа сердца и сосудистой системы, исчезает одышка, пульс становится ровным.
• Способствует снижению артериального давления.
• Полезен при физических нагрузках (особенно из белых ягод). Сок даёт прилив сил и бодрости, а за счёт высокого содержания железа кислород лучше проникает в ткани.
• Помогает лечить заболевания дыхательных путей, смягчает кашель. Виноградный сок полезно пить при бронхите и астме, он выводит мокроту из лёгких.
• Снимает воспаления в ротовой полости. Если во рту есть язвочки, ранки или кровят дёсны, напиток ускорит их заживление.
• Оказывает мягкий слабительный эффект в отличие от целых ягод винограда, которые наоборот могут стать причиной запоров. Употребление напитка поможет наладить пищеварение и очистить кишечник.
• Обладает мочегонными свойствами. Виноградный сок полезен при некоторых почечных заболеваниях за счёт своего свойства снимать воспаления.
• Улучшает работу головного мозга. Регулярное употребление напитка принесёт пользу всем, кто занят интеллектуальной деятельностью, а в пожилом возрасте позволит снизить риск развития слабоумия.
• Снимает нервное напряжение и успокаивает. Это в свою очередь помогает нормализовать сон.

Виноградный сок используется не только для приёма внутрь, он популярен и как косметическое средство, на его основе делаются маски для лица и ванночки для рук. Чем полезен:

• Осветляет пигментные пятна.
• Выравнивает тон лица.
• Замедляет появление мелких морщинок.
• Подтягивает кожу.
• Укрепляет ногти.
• Помогает в борьбе с сыпью и угрями.
• Укрепляет волосы.
• Очищает поры.

Перед наружным использованием виноградного сока необходимо убедиться в отсутствии аллергии на него.

Чем вреден

Несмотря на массу полезных качеств, виноградный сок может быть вреден. Что нужно знать:

• Свежевыжатый напиток нельзя пить вместе с другими фрешами во избежание расстройства желудка. Лучше всего употреблять сок после еды.
• Если виноградный сок используется как лечебное средство, его нельзя совмещать с продуктами брожения — квасом, пивом и т. п.
• Употребление большого количества сока запрещено при ожирении.
• Желчнокаменная болезнь является противопоказанием для употребления напитка в любом виде.
• Сок винограда из-за высокого содержания кислот вреден для зубной эмали и может способствовать появлению кариеса. Чтобы избежать этого, нужно после употребления прополоскать рот и почистить зубы.
• Напиток противопоказан при сахарном диабете.
• В покупном соке содержатся канцерогены, провоцирующие рост раковых клеток. Это связано с различными добавками в промышленном продукте, а также со способом приготовления. В натуральном фреше вредных веществ нет.
• Покупной виноградный сок за счёт огромного количества сахара способствует набору лишних килограммов. В натуральном домашнем напитке количество сахара ниже и соответствует дневной норме, однако и в этом случае не стоит злоупотреблять количеством.

Однозначными противопоказаниями для употребления виноградного сока являются:

• Беременность, начиная со второго триместра.
• Склонность к ожирению.
• Сахарный диабет.
• Сильное истощение организма.
• Кормление грудью.
• Возраст до 2 лет.
• Острая форма лихорадки.
• Туберкулёз.
• Кариес.
• Аллергия.
• Почечная недостаточность.
• Язва желудка.
• Язва кишечника.
• Диарея.
• Цирроз печени.
• Нарушение мочеиспускания.

Чтобы избежать возможных проблем со здоровьем, стоит проконсультироваться со специалистом.

Как и с чем лучше пить

Существует целое направление лечения виноградным соком — ампелотерапия. В зависимости от заболевания схема приёма будет разниться:

1. Атеросклероз. При этой болезни нужно пить свежий сок трижды в день по 125 мл перед едой. Длительность курса от 1 до 1,5 месяцев.
2. Запоры. Те же 125 мл пьют два раза в день. Курс лечения 2 месяца. Противопоказано при гастрите.
3. Подагра. Больным полезно не только пить сок дважды в день, но и есть обычный виноград.

Во всех случаях фреш желательно разводить водой, а после употребления полоскать рот, чтобы не повредить зубную эмаль.

Заключение

В умеренных количествах свежий виноградный сок полезен для здоровья. В напитке содержится множество витаминов и микроэлементов, которые благотворно влияют на работу всех систем организма. Самым лучшим считается напиток, приготовленный из свежих спелых ягод без термической обработки — фреш. Магазинные соки практически не содержат полезных веществ, а количество сахара в них сильно превышает норму.

Самый полезный сок

Яркие по цвету, сладкие на вкус, богатые полезными веществами – казалось бы, пей соки и становись здоровее день ото дня. Тем не менее вопрос: «Какой сок самый полезный?» остается актуальным. Ищем на него ответ.

Соки богаты натуральными сахарами – фруктозой, глюкозой, органическими кислотами и микроэлементами, которые содержатся в свежих фруктах, овощах и ягодах. Но надо учитывать, что в процессе изготовления соков значительная часть содержащихся в плодах витаминов (например, витамин С, фолиевая и пантотеновая кислоты, β-каротин) теряется. Поэтому производители часто дополнительно обогащают соки, вводя в некоторые напитки такие витамины и минералы, как В1, В2, железо, кальций, магний, что повышает пищевую ценность соков. Кроме того, в соках много воды, поэтому они усваиваются намного легче, чем свежие плоды.

Кстати, диетологи считают, что овощные соки полезнее фруктовых, так как в них меньше сахаров. Овощные соки лучше, чем фруктовые, стимулируют работу органов пищеварения и активнее очищают организм от токсинов, благодаря чему их можно использовать как приятное дополнение к диетам, способствующим похудению.

СОК, МОРС ИЛИ НЕКТАР?

Из пакетированных напитков самым полезным считается сок, на пачке которого написано «восстановленный» или «прямого отжима». В таких напитках нет красителей, ароматизаторов, консервантов, усилителей вкуса. Восстановленный сок получается, когда концентрат сока разводят водой. Причем воды наливают ровно столько, сколько выпарили из концентрата. Надпись «сок прямого отжима» говорит сама за себя. Такие соки можно хранить не больше 3 месяцев, поэтому они неудобны производителям и чаще всего на полах магазинов мы видим восстановленные соки.

В нектаре содержится 25-50% натуральной вытяжки фруктов, остальное приходится на консервант – лимонную кислоту, воду, сахар.

В морсе вытяжки из плодов всего 15%, остальное приходится на долю воды и искусственных добавок – ароматизаторов и консервантов.

СОКИ ДЛЯ ДЕТЕЙ

Вопрос об оптимальных сроках введения соков в рацион грудничков до сих пор остается открытым. Долгие годы педиатры рекомендовали знакомить малыша с ними с 3-4 недель. Но многочисленные исследования показали, что 60% крох плохо переносят столь раннюю встречу с этими напитками. Кроме того, из всех блюд прикорма у соков наименьшая питательная и энергетическая ценность. Так что относиться к ним следует как к десерту.

Если поторопиться с введением соков в рацион крохи, есть довольно большой риск аллергической реакции и сбоев в работе системы пищеварения – срыгиваний, учащения стула, вздутия живота, усиления газообразования.

Поэтому соки вводят в прикорм в период с 4 до 6 месяцев. Первая порция – 5 мл. Затем, постепенно увеличивая, объем выпиваемого за 2-3 приема в день не разбавленного водой сока к концу первого года жизни доводят до 100 мл. Знакомство начинают с монокомпонентных представителей соков (яблочный, грушевый), недели через 2-3 можно попробовать овощные соки (тыквенный, морковный), после 5 месяцев – фруктово-ягодные, фруктово-овощные.

Детям в возрасте от 1 года до 6 лет рекомендуется выпивать за день не больше 150 мл неразбавленного сока, от 7 до 18 лет – 250-300 мл.

Если же ребенок буквально фанатеет от сока и возрастной нормой дело явно не ограничится, попробуйте разбавлять сок кипяченой, питьевой или негазированной минеральной водой. Таким образом вы уменьшите количество калорий в каждой порции.
При этом следует учитывать, что соки могут, как благоприятно повлиять на работу желудочно-кишечного тракта, так и иметь отрицательный эффект.

Например, виноградный сок, в котором много глюкозы, может усилить газообразование в кишечнике. Яблочный сок за счет яблочной кислоты способен простимулировать выработку в желудке соляной кислоты и таким образом возбуждает аппетит. Соки с мякотью (пищевыми волокнами): абрикосовый, сливовый, морковный, нектар из чернослива, персиковый – обладают послабляющим действием и могут помочь справиться с запорами. Соки из черной смородины, крыжовника, груши, черники, имеющие в составе дубильные вещества – танины, наоборот, в разной степени закрепляют стул.

СВЕЖЕВЫЖАТЫЕ СОКИ

Свежевыжатые соки (фреши) обладают ярко выраженным действием, поэтому даже взрослым рекомендуется ежедневно выпивать не больше 250 мл такого напитка. Если вы намереваетесь собственноручно отжать сок, выбирайте самые спелые плоды и учтите, что выпивать его надо практически сразу: витамины в свежеотжатом соке быстро разрушаются. Уже через 10 минут их остается ровно половина от первоначального количества. Употреблять свежевыжатые соки лучше между приемами пищи, как минимум за полчаса до еды.

ОВОЩНЫЕ СОКИ

Морковный сок полезен при проблемах со зрением. Его используют при лечении язвы желудка, анемии. Сок повышает аппетит, укрепляет зубы и нервную систему. Так как он богат жирорастворимыми витаминами (например, провитамином А), для лучшего усвоения в него рекомендуется добавлять немного сливок или растительного масла. Сок также содержит много железа, меди, благодаря чему стимулирует обмен веществ.

Свекольный сок содержит железо, фолиевую кислоту, витамины С, РР, Р и группы В. Стимулирует образование эритроцитов (красных кровяных телец), богат йодом. Пить свекольный сок лучше в смеси с морковным в соотношении 1:4, но понемногу.

Огуречный сок обладает хорошим мочегонным действием. Так как в нем до 40% калия, он улучшает работу сердечно-сосудистой системы. Также этот напиток способствует улучшению памяти, повышению аппетита, помогает сохранить тонус кожи. Обратите внимание, его действие усиливается в сочетании с черносмородиновым, яблочным, грейпфрутовым соками.

Томатный сок самый малокалорийный – всего 230 Ккал в 1 литре. Но желающие похудеть ценят его не только за это! Сок отлично утоляет как жажду, так и голод. Кроме того, он богат органическими кислотами – молочной, яблочной, которые способствуют хорошему обмену веществ.Содержит фитонциды, подавляющие процессы брожения и гниения в кишечнике.

Тыквенный сок – источник витаминов Е и группы В. Повышает уровень гемоглобина в крови. Очень полезен детям. Его рекомендуется использовать при ожирении и сахарном диабете. Тыквенный сок можно пить и сам по себе, и в сочетании с морковным или яблочным соками.

ФРУКТОВЫЕ СОКИ

Ананасовый сок богат бромелайном – веществом, которое способствует быстрому сжиганию жиров. Его рекомендуют пить во время обильного застолья, когда приходится есть много мяса, ведь этот сок повышает активность желудочного сока.

Грейпфрутовый сок содержит нарингин – вещество, также способствующее ускорению сжигания жиров. Улучшает работу органов пищеварения, помогает снизить содержание холестерина в крови. Очень полезен при ОРВИ. Но им ни в коем случае нельзя запивать лекарства. Из-за стимулирующего действия сока на желудок реакция организма на препарат может измениться и оказаться совсем не такой, как ожидалось.

Яблочный сок обладает мочегонным и желчегонным действием. Низкокалориен, но вместе с тем повышает аппетит. Содержит много железа, а значит полезен при анемии. Пектиновые вещества, которые тоже в большом количестве содержатся в этом соке, помогают очистить организм от шлаков.

Абрикосовый сок благодаря высокому содержанию калия укрепляет сердце и помогает выводить из тканей лишнюю жидкость. В нем много фосфора и магния, за счет чего улучшается память и повышается работоспособность. Но из-за высокого содержания сахара этот сок противопоказан при сахарном диабете и лишнем весе.

Березовый сок не относится ни к фруктовым, ни к овощным. Но это не сказывается на его полезности. Он обладает мочегонным, желчегонным, слабительным действием. За счет послабляющего действия сок выводит из организма токсины.